Método Kjeldahl: Determinación de nitrógeno para la cuantificación de proteínas.

¿Qué es el método Kjeldahl?

Equipos para el método Kjeldahl: bloque digestor, scrubber y destilador de nitrógeno

El método Kjeldahl es un análisis de química húmeda que determina el nitrógeno total de una muestra y, a partir de él, calcula la proteína bruta. Consta de tres etapas: digestión con ácido sulfúrico, destilación por arrastre de vapor y titulación. Es el método más tradicional para esta aplicación, desarrollado hace más de 130 años por el danés Johan Kjeldahl, y está presente en normas oficiales como AOAC y Standard Methods.

Es el método más tradicional para esta aplicación y fue desarrollado hace más de 130 años por el dinamarqués Johan Kjeldahl, que estudiaba proteínas en granos. 

¿En qué normas y sectores se usa el método Kjeldahl?

El método Kjeldahl está presente en diversas normas oficiales, como AOAC, Standard Methods for the Examination of Water and Waste water, entre otras. Tales normas aseguran características como calidad, seguridad, confiabilidad y eficiencia. Su aplicación abarca diversos sectores de la industria, como alimentos, suelos, agro.

¿Cuáles son las tres etapas del método Kjeldahl?

Se divide en tres etapas:

  • Digestión: En esta etapa es homogeneizada y pesada la muestra para ser digerida con ácido sulfúrico concentrado y adicionando un catalizador para acelerar el proceso.
  • Destilación: La destilación es por arrastre de vapor. La solución de sulfato de amonio obtenida de la digestión es enfriada a temperatura ambiente y llevada al destilador de nitrógeno. En este punto es agregado hidróxido de sodio que junto el vapor de agua de la caldera del destilador, forman hidróxido de amonio liberado como gas. Este gas es enfriado en el sistema de condensación y condensado en un Erlenmeyer que contiene ácido bórico y un indicador.
Reacciones de la destilación Kjeldahl: sulfato de amonio con hidróxido de sodio, liberación de amoníaco y captura en ácido bórico
  • Titulación: Realizada con una bureta, normalmente, ácido clorhídrico y un indicador, para reaccionar con el borato de amonio formado en la etapa de destilación. Finalmente, con el volumen gastado y la formula estequiométrica se determina el % en peso de proteína bruta.

¿Cómo se calcula el porcentaje de proteína bruta?

Fórmula del porcentaje de proteína bruta por el método Kjeldahl

V: Volumen de HCl utilizado para titular la muestra – Volumen HCl usado para titular el blanco.
F: Factor de la solución de HCl.
N: Normalidad de la solución de HCl
P: Peso de la muestra
6,25: factor de conversión de nitrógeno a proteína (es el factor general; varía según el alimento).

¿Qué equipos se necesitan para el método Kjeldahl?

Un sistema Kjeldahl completo reúne un bloque digestor para la digestión ácida, un scrubber que neutraliza los gases y un destilador de nitrógeno para la destilación por arrastre de vapor. En INBOX Technology LATAM representamos a Tecnal y ofrecemos el sistema completo, con asesoría de aplicación y servicio técnico propio, para la determinación de proteínas en alimentos, suelos y todo análisis que requiera cuantificar nitrógeno. Solicite una cotización o escríbanos a inbound@inboxsa.com.

Preguntas frecuentes

¿Qué determina el método Kjeldahl?
El nitrógeno total de una muestra. A partir de ese valor, con un factor de conversión, se calcula la proteína bruta.

¿Cuáles son las etapas del método Kjeldahl?
Tres: digestión de la muestra con ácido sulfúrico concentrado y un catalizador; destilación por arrastre de vapor, donde el amoníaco liberado con hidróxido de sodio se recoge en ácido bórico; y titulación con ácido clorhídrico.

¿Cómo se calcula el porcentaje de proteína bruta?
Con el volumen de ácido clorhídrico gastado en la titulación (descontado el blanco), el factor y la normalidad de la solución, el peso de la muestra y el factor de conversión de nitrógeno a proteína.

¿En qué sectores se usa el método Kjeldahl?
Alimentos, suelos y agro, entre otros. Está incluido en normas oficiales como AOAC y Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater.

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